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細菌回復突變試驗找中國權威機構單位飛凡認證公司

放大字體  縮小字體 發布日期:2018-09-23

飛凡檢測是國內權威第三方檢測服務機構,飛凡檢測長期從事AMES試驗,擁有多年的檢測經驗,出具權威資質報告。詳情咨詢:13764818040,地址:上海市豫園路750號。
一、概況
Ames試驗又稱鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體試驗。本方法是利用鼠傷寒沙門菌的組氨酸營養缺陷型菌株發生回復突變的性能來檢測被檢物質是否具有致突變性。
二、試驗原理
AMES試驗是一種利用微生物進行突變的體外致突變實驗法,利用一種利用突變型微生物菌株與被檢化學物質接觸,如果該化學物質具有致突變性,則可使突變性微生物發生回復突變,重新成為野生型微生物。
具有組氨酸缺陷型的沙門氏菌株,均含有控制His合成的基因,而培養基中不含組氨酸時,它們便不能生長。然而,當某些被檢物質具有致突變性時,因這類物質作用于細菌的DNA,使其特定部位發生基因突變而回復為有合成His能力的野生型菌株時,就又能在無組氨酸的培養基中生長。常用的沙門氏菌株有TA98、TAl535、TA100和TA1588。每種菌株所檢測的誘變物的種類不同,每次試驗可同時使用幾種菌株,只要其中有任何一株發生回變即屬陽性反應結果。
考慮到許多物質是在體內經代謝活化后才顯示出致突變性,艾姆斯等人采用了在體外加人哺乳動物肝微粒體酶系統(簡稱S-9混合液)使被檢物活化的方法,保證了試驗結果更近似于哺乳動物的代謝情況,同時可提高陽性檢出率。S-9混合液是在低溫無菌的條件下制備的,它是經多氯聯苯或苯**誘導的雄性大白鼠**制成勻漿離心后的上清液。每次試驗之前從液氮罐中取出上清液后,再加入輔酶和6-磷酸-葡萄糖,即為配制成的肝微粒體酶系統。但是,在檢測飲用水樣時,加入S-9混合液并不能提高其陽性檢出率,而要發致突變陰性報告時,則必須要做加入S-9混合液檢驗各個項目均為陰性,并有重現性才能發陰性報告
三、步驟和方法
Ames試驗的常規方法有斑點試驗和平板摻入試驗。菌株鑒定用于測試的菌株,需經基因型和生物學性狀鑒定,符合要求才能投入使用。鑒定前先進行增菌培養。為鑒定結果可靠,需同時培養野生型TV菌株,作為測試菌基因型之對照。

 
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